發布時間:2018-12-12
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分光光度計是利用物質對光的選擇性吸收的特性,以較純的單色光作為(wei) 入射光,測定物質對光的吸收,從(cong) 而對物質進行定性或定量分析的儀(yi) 器。在使用過程中常常會(hui) 出現測量誤差,這些誤差又是如何產(chan) 生的呢?
1.複色光對比耳定律的偏離
比耳定律成立的前提條件是人射光是單色光,但是精度再高的儀(yi) 器,即使是雙單色器的分光光度計,也隻能獲得近乎單色的光,無法獲得純單色光,它仍然含有狹窄光通帶,具有複色光的性質。而複色光會(hui) 導致比耳定律的正或負偏離。
固定狹縫的紫外分光光度計光譜帶寬一般為(wei) 1nm或2nm,可調狹縫的可以做到0.1nm;可見分光光度計帶寬6nm、snm,甚至十幾納米。
光譜帶寬應該是越小越好,但是,隨著光譜分辨率的提高,儀(yi) 器的靈敏度降低,所以,選擇儀(yi) 器時要綜合考慮各種條件的影響。當溶液濃度較小且單色光較純時,可近似認為(wei) 符合比耳定律。
2.雜散光的影響
雜散光是指進人檢測器的處於(yu) 待測波長光譜帶寬範圍外的其他波長組分,它是光譜測量中誤差的主要來源。產(chan) 生原因有:
分光光度計的色散元件、反射鏡、透鏡及單色器內(nei) 壁灰塵等。在分光光度計工作波段邊緣波長處,由於(yu) 單色器透光率、光源輻射強度、檢測器靈敏度都較低,雜散光的影響更為(wei) 顯著。
雜散光限製儀(yi) 器的分析上限可引起嚴(yan) 重的測量誤差,實際工作中,在定量分析時,一般在吸收峰或其附近處測量樣品吸光度,如果在分析波長處含有雜散光,這時樣品的透光率較小,而雜散光大部分透過,使測量吸光度低於(yu) 真實吸光度。
3.儀(yi) 器噪聲對測t的影響
儀(yi) 器噪聲也是儀(yi) 器的一個(ge) 重要指標,它表征儀(yi) 器做稀溶液的能力。是疊加在待測量的分析信號中的不需要的信號,掃描100%T和0%T線,可觀察到分光光度計的噪聲水平,如果儀(yi) 器噪聲較大,會(hui) 掩蓋較小的測量信號,一般用噪音的二倍來表示儀(yi) 器的靈敏度。
4.波長和吸光度準確度
樣品的每一個(ge) 值都是在一定的波長下測得的,如果,波長誤差很大,測出的值肯定不準。吸光度準確度也是用戶對儀(yi) 器的直接要求,更應引起足夠的重視。
國家計量檢定規程規定雙光束紫外可見分光光度計透射比準確度為(wei) *士0.6%,B級土1.0%。
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